冷凍研磨儀在藻類植物上的研磨應(yīng)用

      冷凍研磨儀可以對硬性、軟性、彈性等樣品進行快速的粉碎和均相化處理，符合理化分析實驗室的要求，配置不同體積、不同材料的研磨罐，可以進行干磨、濕磨及冷凍研磨，也可以進行細(xì)胞破碎和DNA/RNA提取，在生物醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、地質(zhì)、化工、RoHS、玩具、環(huán)境、質(zhì)檢、高校等各行各業(yè)都有廣泛的應(yīng)用。
      冷凍研磨儀具有對稱的一對高速大振幅的搖臂，通過小球或不銹鋼小珠在樣品管內(nèi)來回不規(guī)則撞擊及摩擦，在幾秒到幾分鐘內(nèi)輕松實現(xiàn)樣品的研磨、粉碎、混合及細(xì)胞破壁，實現(xiàn)精細(xì)研磨。
      藻類的特異性色素是葉綠素、葉黃素和胡蘿卜素。浮游藻類里常見的三種葉綠素是葉綠素a,b和c。葉綠素a在一切浮游藻類里大約占有機物干重的1-2%,是估計藻類生物量的良好指標(biāo).細(xì)胞的葉綠素含量隨種類或類群而有所不同,同時還受年齡、生長率、光和營養(yǎng)條件的影響.脫鎂葉綠素a能夠干擾葉綠素a的測定,因為如果存在脫鎂葉綠素a,它能在葉綠素a的相同光譜區(qū)吸收光和熒光,造成葉綠素a值的誤差.當(dāng)測定葉綠素a的時候還要測定脫鎂葉綠素a.葉綠素a和脫鎂葉綠素a之比可作為浮游植物生理條件的一個良好指標(biāo)。動植物組織研磨機在研究工作中起到制樣的作用，可為研究提供有效的幫助。
      檢測限隨熒光計結(jié)構(gòu)與流速而變,對于大多數(shù)葉綠素與降解產(chǎn)物來說,每次進樣檢測限范圍在10-100pg.HPLC法的度主要取決于色素標(biāo)準(zhǔn)樣的純度.更理想的方法是測定標(biāo)準(zhǔn)樣的吸收光譜并與相關(guān)數(shù)據(jù)相比較.色素的純度也可用HPLC法來測定,條件是不存在能與標(biāo)準(zhǔn)物的吸收和熒光譜帶相重疊的共洗脫污染物.如果分光光度法測得的數(shù)據(jù)經(jīng)脫鎂色素校正,HPLC的結(jié)果表達(dá)為色素當(dāng)量,那么HPLC法與分光光度法提供的色素濃度與提供的EPA標(biāo)準(zhǔn)符合得很好.因此如果明顯的存在色素衍生物,用分光光度法測得的數(shù)據(jù)會偏高.要HPLC法與熒光法測得的數(shù)據(jù)一致則取決于附加的葉綠素b,c和它們的衍生物。
      通過冷凍研磨儀制備的標(biāo)準(zhǔn)物校準(zhǔn)HPLC系統(tǒng)的工作標(biāo)準(zhǔn).混合1ml標(biāo)準(zhǔn)物與300LL蒸餾水,搖動,平衡5分鐘后進樣.用300LL標(biāo)準(zhǔn)液漂洗注射器2次,注射器中吸入500LL標(biāo)準(zhǔn)液用于進樣,將注射器插入進樣閥,充滿200L的進樣環(huán)管.混合1ml90%丙酮與300LL蒸餾水作為空白液.建立標(biāo)準(zhǔn)色素濃度與熒光峰面積(或高)的標(biāo)準(zhǔn)曲線.這種方法為葉綠素與類胡蘿卜素的分離而設(shè)計,同時也可以分離主要的葉綠素分解產(chǎn)物.方法由測定三倍進樣的浮游植物群落和植物的提取物確定.使用合適的內(nèi)標(biāo)物可提高度。